國(guó)產(chǎn)液相色譜儀到底什么樣

　　一臺(tái)品質(zhì)優(yōu)良的液相色譜系統(tǒng)應(yīng)從以下幾個(gè)方面考慮：

　　一．主要技術(shù)指標(biāo)優(yōu)異：

　　首先是如何看指標(biāo)。液相色譜儀的指標(biāo)很多，有泵的、檢測(cè)器的、色譜柱等等。我們認(rèn)為要看主要技術(shù)指標(biāo)，根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，儀器的主要指標(biāo)有噪音，漂移，小檢測(cè)濃度，定性定量重復(fù)性等。這些指標(biāo)都要放在系統(tǒng)，回路里去看，去比較。就是需要把各單元裝置都要聯(lián)接好，如接好色譜柱，進(jìn)樣閥，并且要通上流動(dòng)相。因?yàn)槟诜治鲋幸捕际锹?lián)接好以后才可以進(jìn)行分析的，而不是單單用個(gè)檢測(cè)器或是泵的。

　　然后在這個(gè)基礎(chǔ)上，我們?cè)偃ケ容^這些主要指標(biāo)。

　　1．噪音

　　是指由儀器的電器元件、溫度波動(dòng)、電壓的線性脈沖以及其他非溶質(zhì)作用產(chǎn)生的高頻噪聲和基線的無(wú)規(guī)則波動(dòng)。噪音的大小直接關(guān)系到儀器的檢測(cè)靈敏度，噪音越大，檢測(cè)的靈敏度就越低。對(duì)于檢測(cè)低含量的樣品就要求儀器的噪音越小越好，否則噪音過(guò)大將會(huì)導(dǎo)致基線不穩(wěn)，甚至影響分析結(jié)果。

　　2．小檢測(cè)濃度（小檢測(cè)限）

　　是反映儀器靈敏度的重要參數(shù)。CL=2×Nd×C/H（CL ：小檢測(cè)濃度 Nd:噪音 C：樣品濃度小檢測(cè)濃度 H：樣品峰高）由上式可見，小檢測(cè)濃度是和噪音成正比的，噪音越大，小檢測(cè)濃度就越大，靈敏度就越低。某些廠家回避了這個(gè)指標(biāo)，說(shuō)明他們不愿在小檢測(cè)濃度的基礎(chǔ)上去比較噪音。

　　3．漂移

　　是指儀器穩(wěn)定后一段時(shí)間內(nèi)基線漂離原點(diǎn)的距離，通常用來(lái)衡量?jī)x器穩(wěn)定快慢。高品質(zhì)的儀器能在較短的時(shí)間內(nèi)達(dá)到穩(wěn)定，從而在一定程度上提高了分析效率。

　　4．定性定量重復(fù)性

　　主要是考核儀器穩(wěn)定性的指標(biāo)，這對(duì)于分析樣品來(lái)說(shuō)是非常重要的。好的儀器其穩(wěn)定性應(yīng)該是十分不錯(cuò)的，這就要求多次進(jìn)樣保留時(shí)間及含量的一致性，這樣做出來(lái)的結(jié)果才能使人信服。

　　有的朋友會(huì)認(rèn)為這些指標(biāo)好像都是檢測(cè)器的。對(duì)的，但是就前面所說(shuō)條件是要放在整個(gè)回路和系統(tǒng)里去看去比較。例如：泵的脈動(dòng)會(huì)直接影響噪音指標(biāo)，泵的流量準(zhǔn)確度、精度指標(biāo)，以及密封性不好也會(huì)影響相關(guān)指標(biāo)。所以要系統(tǒng)地看指標(biāo)。例如：某些公司在公布的指標(biāo)中，噪音和漂移指標(biāo)寫的條件是空池或有的干脆不寫。這個(gè)指標(biāo)只考核了UV檢測(cè)器光學(xué)和電氣的特性，與實(shí)際情況相差甚遠(yuǎn)，并沒有考驗(yàn)泵的壓力脈動(dòng)，液流回路的阻尼和UV檢測(cè)器流通池的性能。所以我們認(rèn)為從以上的主要指標(biāo)中可以反應(yīng)出儀器的一些真實(shí)水平。

　　二．操作方便：

　　操作方便性無(wú)論是對(duì)新手還是成熟的用戶都是很重要的。操作越簡(jiǎn)單，有利于提高分析效率，也為以后分析方法的拓展提供有力的幫助。上海伍豐科學(xué)儀器有限公司的WS-100工作站軟件實(shí)現(xiàn)了真正的智能化操作。它摒棄了以往工作站軟件只能起到數(shù)據(jù)處理的理念，*在國(guó)內(nèi)推出了集控制與后處理于一身的軟件，在操作使用上給用戶帶來(lái)了方便。

　　三．系統(tǒng)的，整體開發(fā)

　　這里指的是儀器的整體開發(fā)，是一個(gè)完整的系統(tǒng)。目前市場(chǎng)上有這個(gè)現(xiàn)象，說(shuō)我的泵是進(jìn)口的，或者是檢測(cè)器怎么好，用了什么很多的進(jìn)口件組裝等等。其實(shí)這是個(gè)誤區(qū)。液相色譜是個(gè)復(fù)雜的系統(tǒng)，不是整體開發(fā)的，各項(xiàng)指標(biāo)之間、軟件和硬件、硬件和硬件等都不匹配，整體水平不會(huì)高到哪里去，而且在售后服務(wù)方面對(duì)用戶也是不負(fù)責(zé)任的。

　　整體開發(fā)的主要優(yōu)點(diǎn)有：各項(xiàng)技術(shù)指標(biāo)統(tǒng)一、儀器各單元的通信協(xié)調(diào)、能夠建立一個(gè)整體的數(shù)字化評(píng)價(jià)系統(tǒng)、體現(xiàn)了企業(yè)的科技及開發(fā)實(shí)力。

　　國(guó)外的儀器生產(chǎn)廠家的產(chǎn)品也是整體開發(fā)的，所以能夠保證儀器的整體水平。

　　四．穩(wěn)定可靠，故障率低

　　這個(gè)大家都知道，就不多說(shuō)了。

　　二、液相色譜儀的小檢測(cè)濃度和流通池的光程（體積）之間的關(guān)系與含義

　　某些國(guó)產(chǎn)儀器在公布其技術(shù)指標(biāo)時(shí)，大多只寫了“噪音和漂移”的指標(biāo)。用戶覺得指標(biāo)都差不多，但卻忽略了另外二個(gè)較為重要的指標(biāo)：“小檢測(cè)濃度和光程”，這二個(gè)指標(biāo)有什么作用呢？它們代表了什么含義？

　　這里來(lái)解釋一下：

　　小檢測(cè)濃度是考驗(yàn)儀器的靈敏度。小檢測(cè)濃度數(shù)值大，儀器的靈敏度就小，不能反應(yīng)真正的噪音和漂移水平。例如：我公司的小檢測(cè)濃度小于1×10-8g/ml (萘/甲醇溶液)，而某些儀器是：4×10-8g/ml (萘/甲醇溶液)。這就說(shuō)明我們的儀器靈敏度大，可以檢測(cè)更微量的樣品。同樣如我公司儀器把小檢測(cè)濃度調(diào)較得和其它產(chǎn)品是一樣，也就表明我們可以做得比其它產(chǎn)品噪音和漂移低4倍。

　　可以從這個(gè)公式看出：

　　小檢測(cè)濃度=2×儀器的噪音×進(jìn)樣的樣品濃度/樣品的峰高值

　　那光程又代表什么？我們先看下面一個(gè)公式，比爾定律：

　　A=log(I0/I)=εCL

　　A是吸收率；I0代表參照池的光強(qiáng)；I為樣品池的光強(qiáng)；ε為摩爾吸光系數(shù)；C是樣品濃度；L就是流通池的光程。

　　可以看出在同樣的“C”樣品濃度情況下，“L”流通池的光程越大,儀器的“A吸收率”也就越大。這樣可以檢測(cè)到的樣品濃度就越小。為什么有些廠家把儀器的流通池光程做得很小，有些只有：3.5mm、4.5mm或5.5mm，而不是我公司的8mm。這是因?yàn)檫@些廠家不能有效的降低整個(gè)系統(tǒng)的“噪音和漂移水平”，只能犧牲流通池光程，也就是犧牲了儀器的檢測(cè)靈敏度和小檢測(cè)濃度，來(lái)達(dá)到降低“噪音和漂移水平”目的。用通俗的說(shuō)法比喻：HPLC就是一臺(tái)音響，光程就是這臺(tái)音響的音量控制鍵，光程越小就是把音量調(diào)小了，耳朵對(duì)音響本身的噪音和失真（可以理解為儀器的噪音和漂移）感覺就越小。但也就說(shuō)明了這些儀器整體系統(tǒng)的制造水平不高。

　　三、液相色譜儀對(duì)流動(dòng)相的要求

　　1.首先必須是HPLC級(jí)的，這一條相信大家都做到了。

　　2.脫氣。由于流動(dòng)相里含有微量空氣，經(jīng)泵的壓力作用，會(huì)在流通池里產(chǎn)生氣泡，這對(duì)分析產(chǎn)生一定的影響，如噪音增大，甚至于掩蓋信號(hào)峰。因此，流動(dòng)相在使用前必須經(jīng)超聲脫氣30分鐘以上。

　　3.過(guò)濾。由于流動(dòng)相里有很微小的垃圾，如不經(jīng)過(guò)過(guò)濾，偶爾會(huì)卡在單向閥門中，從而產(chǎn)生壓力波動(dòng)。這一點(diǎn)很多用戶不太注意，等到產(chǎn)生壓力波動(dòng)又不知道什么原因產(chǎn)生的。

　　四、高效液相色譜系統(tǒng)中氣泡對(duì)檢測(cè)的影響及其解決方法

　　在我們進(jìn)行液相色譜分析時(shí)，有時(shí)會(huì)遇到這樣一個(gè)問(wèn)題：系統(tǒng)的流路中存在氣泡。

　　由于氣泡的存在，會(huì)造成色譜圖上出現(xiàn)尖銳的噪聲峰，嚴(yán)重時(shí)會(huì)造成分析靈敏度下降；氣泡變大進(jìn)入流路或色譜柱時(shí)會(huì)使流動(dòng)相的流速變慢或不穩(wěn)定，使基線起伏。

　　造成上述現(xiàn)象的主要原因有三條：一是流動(dòng)相溶液中往往因溶解有氧氣或混入了空氣而形成氣泡；二是系統(tǒng)開始工作時(shí)未能將流路中的空氣驅(qū)趕干凈；三是在注入樣品時(shí)不注意混入了空氣。

　　為了避免這類問(wèn)題的出現(xiàn)，液相色譜實(shí)際分析過(guò)程中必須重視對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行脫氣處理。

　　常用的脫氣方法有以下幾種：

　　1.        吹氦脫氣法 使用在液體中比空氣溶解度低的氦氣，在0.1Mpa壓力下，以約60ml/min流速通入流動(dòng)相10-15min以驅(qū)除溶解的氣體。此法使用于所有的溶劑，脫氣效果較好，但在國(guó)內(nèi)因氦氣價(jià)格較貴，本法使用較少；

　　2.        加熱回流法 此法的脫氣效果較好；

　　3.        抽真空脫氣法 此時(shí)可使用微型真空泵，降壓至0.05-0.07MPa即可除區(qū)溶解的氣體。顯然使用水泵連接抽濾瓶和G4微孔玻璃漏斗可一起完成過(guò)濾機(jī)械雜質(zhì)和脫氣的雙重任務(wù)。由于抽真空會(huì)引起混合溶劑組成的變化，故此法適用于單一溶劑體系脫氣。對(duì)多元溶劑體系應(yīng)預(yù)先脫氣后再進(jìn)行混合，以保證混合后的比例不變。

　　4.        超聲波脫氣法 它是目前實(shí)驗(yàn)室使用廣泛的脫氣方法，將配制好的流動(dòng)相連同容器一起放入超聲波水漕中脫氣10-20min即可。該方法操作簡(jiǎn)便，基本能滿足日常分析的要求。

　　5.        在線真空脫氣法 把真空脫氣裝置串聯(lián)到儲(chǔ)液系統(tǒng)中，并結(jié)合膜過(guò)濾器，實(shí)現(xiàn)了流動(dòng)相在進(jìn)入輸液泵前的連續(xù)真空脫氣。此法的脫氣效果明顯優(yōu)于上述幾種方法，并適用于多元溶劑體系。

　　其二，在液相色譜系統(tǒng)開始工作前，可以用注射器連接恒流泵的排空閥，抽入流動(dòng)相，將流路中的空氣驅(qū)趕干凈。

　　其三，在注入樣品前注意排出樣品注射器中的空氣。

　　五、液相色譜系統(tǒng)的日常維護(hù)及注意事項(xiàng)（之一）

　　儀器安裝條件與注意事項(xiàng)

　　安裝本儀器的實(shí)驗(yàn)臺(tái)應(yīng)水平、穩(wěn)固、并具有足夠的放置空間。避免在具有腐蝕性氣體、大量灰塵或能產(chǎn)生強(qiáng)磁場(chǎng)的地方安裝本儀器，否則將會(huì)影響儀器的正常運(yùn)轉(zhuǎn)及縮短儀器的使用壽命。

　　由于儀器所用溶劑是易燃并且有毒，故安裝設(shè)備的房間應(yīng)通風(fēng)良好，應(yīng)具有向外排風(fēng)的裝置，否則可能會(huì)引起中毒或身體不適，也可能會(huì)引起火災(zāi)。

　　應(yīng)安裝四個(gè)以上三芯電源插座（220V，5～10A），必須具有專門的接地線（注意,絕不能將電源線的中線作為接地線），并確保輸出電源的電壓穩(wěn)定，否則會(huì)導(dǎo)致儀器的不正常運(yùn)作。

　　如果實(shí)驗(yàn)室無(wú)的接地線，一般可用Φ15～20mm的銅棒打入地下1～1.5米，用Φ1.2mm左右的塑膠單股導(dǎo)線連接到電源插座的接地端。

　　如果實(shí)驗(yàn)室電壓不穩(wěn)定，應(yīng)使用穩(wěn)壓器等必要設(shè)備，使電源電壓穩(wěn)定。

　　實(shí)驗(yàn)室的室溫應(yīng)控制在15℃-30℃范圍內(nèi)，并且波動(dòng)要小；濕度在45～85%范圍內(nèi)。

　　由空調(diào)或其他設(shè)備產(chǎn)生的氣流不要直吹儀器，避免光線直射及振動(dòng)。

　　儀器的啟動(dòng)順序：先開高壓恒流泵和紫外檢測(cè)器，待紫外檢測(cè)器自檢完畢，回到默認(rèn)波長(zhǎng)254nm后，再開計(jì)算機(jī)及打開工作站軟件。

　　儀器關(guān)閉順序：先按泵停止，關(guān)閉氘燈，退出工作站軟件，然后再關(guān)儀器。

　　儀器應(yīng)由專人負(fù)責(zé)，如果使用人員不固定，請(qǐng)準(zhǔn)備《儀器使用登記本》，以明確使用情況，及時(shí)處理和保養(yǎng)。

　　六、液相色譜系統(tǒng)的日常維護(hù)及注意事項(xiàng)（之二）

　　流動(dòng)相使用的注意事項(xiàng)

　　必須使用HPLC級(jí)或相當(dāng)于該級(jí)別的流動(dòng)相，并要先經(jīng)0.45μm薄膜過(guò)濾。

　　過(guò)濾后的流動(dòng)相必須經(jīng)過(guò)充分脫氣，以除去其中溶解的氣體（如O2），如不脫氣易產(chǎn)生氣泡，增加基線噪聲，造成靈敏度下降，甚至無(wú)法分析。

　　幾中脫氣方法比較：

　　1.        氦氣脫氣法：利用液體中氦氣的溶解度比空氣低，連續(xù)吹氦脫氣，效果較好，但成本高。

　　2.        加熱回流法：效果較好，但操作復(fù)雜，且有毒性揮發(fā)污染。

　　3.        抽真空脫氣法：易抽走有機(jī)相

　　4.        超聲脫氣法：一種較為常見的脫氣法。流動(dòng)相放在超聲波容器中，用超聲波震蕩10～15分鐘，此法效果并不是太好，但操作簡(jiǎn)單。

　　如果管路中使用peek樹脂部件，請(qǐng)不要使用下列流動(dòng)相：

　　濃硫酸、濃硝酸、二氯酸、丙酮、四氫呋、二氯甲烷、氯和二甲基亞砜

　　特別注意：

　　含有緩沖鹽溶液的流動(dòng)相的清洗方法：

　　1．        先用10︰90的甲醇/水沖洗，以洗去緩沖鹽，清洗時(shí)間至少為一小時(shí)。

　　2．        再用90︰10的甲醇/水，沖洗系統(tǒng)，并將系統(tǒng)保存在該流動(dòng)相中。清洗時(shí)間至少為40分鐘。

　　七、液相色譜系統(tǒng)的日常維護(hù)及注意事項(xiàng)（之三）

　　流動(dòng)相的更換

　　在分析過(guò)程中，有時(shí)需要更換流動(dòng)相進(jìn)行分析。一定要注意前一種使用的流動(dòng)相和所更換的流動(dòng)相是不是能夠相溶。如果前一種使用的流動(dòng)相和所更換的流動(dòng)相不能夠相溶，那您就要特別注意了。要采用一種與這二種需更換的流動(dòng)相都能夠相溶的流動(dòng)相進(jìn)行過(guò)渡、清洗。較為常用的過(guò)渡流動(dòng)相為異丙醇，但實(shí)際操作中要看具體情況而定，原則就是采用與這二種需更換的流動(dòng)相都能夠相溶的流動(dòng)相。一般清洗的時(shí)間為30～40分鐘，直至系統(tǒng)*穩(wěn)定。

　　如不進(jìn)行以上“特別注意”上述步驟的操作，將會(huì)導(dǎo)致系統(tǒng)管路堵塞。嚴(yán)重時(shí)將引起流通池污染堵塞，不得不更換流通池。用戶就要承擔(dān)不必要的損失了。

　　儲(chǔ)液器的注意事項(xiàng)：

　　保持流動(dòng)相儲(chǔ)液器的清潔是保證儀器正常使用的關(guān)鍵。要使用HPLC級(jí)的溶劑，對(duì)試劑含有緩沖鹽及非HPLC級(jí)的流動(dòng)相一定要用0.45μm過(guò)濾器除去其中的微粒物質(zhì)。

　　八、液相色譜系統(tǒng)的日常維護(hù)及注意事項(xiàng)（之四）

　　管路連接的注意事項(xiàng)

　　1.        將管子*插入開口端，直至其與開口端的末端相碰為止。否則將產(chǎn)生死體積，引起峰展寬。

　　2.        為了使柱外效應(yīng)減到小，獲得理想的分析結(jié)果，盡量使用管徑細(xì)的管路作為連接。

　　3.        管路接頭不要擰的過(guò)緊，以防損壞螺紋。

　　九、液相色譜系統(tǒng)的日常維護(hù)及注意事項(xiàng)（之五）

　　基本操作注意事項(xiàng)

　　泵運(yùn)行前先打開排空閥，用注射器抽出流動(dòng)相，觀察10秒，流動(dòng)相應(yīng)連續(xù)流出。

　　不用排空閥時(shí)應(yīng)將其關(guān)閉，否則大氣壓力會(huì)使流動(dòng)相從排空閥出口流出。

　　在使用儀器過(guò)程中，注意貯液瓶里的流動(dòng)相是否夠用，如快用盡，應(yīng)及時(shí)更換。

　　更換流動(dòng)相時(shí)務(wù)必停泵，防止吸入大量空氣，影響儀器正常運(yùn)作。

　　在啟動(dòng)分析進(jìn)樣時(shí)，請(qǐng)快速板動(dòng)7725i進(jìn)樣閥，否則會(huì)引起系統(tǒng)壓力突跳，影響儀器的使用壽命。

　　如對(duì)樣品分析的定性定量要求較高，應(yīng)配置柱溫箱，保持溫度恒定。

　　若流動(dòng)相不是純甲醇，樣品分析結(jié)束后，必須用HPLC級(jí)甲醇對(duì)泵及進(jìn)樣閥進(jìn)行清洗，大約半小時(shí)后，待壓力重新回落并穩(wěn)定，方可關(guān)泵。

　　若流動(dòng)相中含有緩沖鹽，則須根據(jù)其特殊的清洗方法進(jìn)行清洗（上述提到過(guò)）。

　　十、液相色譜系統(tǒng)的日常維護(hù)及注意事項(xiàng)（之六）

　　氘燈的保養(yǎng)

　　紫外檢測(cè)器中的氘燈是有一定的使用壽命的。為了節(jié)省燈的使用壽命，在暫時(shí)不使用時(shí)可在不關(guān)機(jī)的情況下，只把燈關(guān)掉（建議：在需要關(guān)燈時(shí)間4小時(shí)以上才關(guān)燈，因?yàn)轭l繁的開關(guān)燈，同樣會(huì)縮短燈的使用壽命）。

　　十一、液相色譜系統(tǒng)的日常維護(hù)及注意事項(xiàng)（之七）

　　色譜柱的保養(yǎng)事項(xiàng)

　　為了保護(hù)色譜柱，延長(zhǎng)其使用壽命，在使用時(shí)應(yīng)采取下列幾方面措施：應(yīng)在柱頭加燒結(jié)片不銹鋼濾片，需要時(shí)加保護(hù)柱，防止柱頭堵塞，影響分析效果。當(dāng)流動(dòng)相的PH>7時(shí)，要用大粒度同種填料作預(yù)柱。溶劑的化學(xué)腐蝕不能太強(qiáng)。要避免微粒在柱頭沉降。為防止高壓沖擊，泵上的壓力限制不宜太高，一般在15～20MPa為宜，在舊柱或梯度洗脫時(shí)應(yīng)稍高些，以避免因上限設(shè)置過(guò)低而造成正常使用中的中途停機(jī)。

　　色譜柱長(zhǎng)時(shí)間不用，存放時(shí)，柱內(nèi)應(yīng)充滿溶劑（甲醇或乙腈），兩端封死。

　　十二、液相色譜系統(tǒng)的日常維護(hù)及注意事項(xiàng)（之八）

　　手動(dòng)進(jìn)樣閥的維護(hù)注意事項(xiàng)

　　在每次使用后，尤其是進(jìn)濃度差異比較大的樣品時(shí)要用工具（不是帶針頭的注射器）沖洗進(jìn)樣閥，沖洗時(shí)必須沖洗進(jìn)樣閥兩頭數(shù)次，每次數(shù)毫升。以防止無(wú)機(jī)鹽沉積和樣品微粒造成閥內(nèi)部磨損或阻塞以及樣品的交叉污染。

　　安裝時(shí)進(jìn)樣閥的5，6出口要與注射器在同一水平線上，以防止虹吸現(xiàn)象的發(fā)生，導(dǎo)致進(jìn)樣量的重復(fù)性變異。

　　進(jìn)樣量的多少要根據(jù)定量管的環(huán)體積決定：

　　當(dāng)樣品量較少時(shí)：進(jìn)樣體積由注射器的進(jìn)樣體積決定，但大體積要小于環(huán)體積的1/2。

　　當(dāng)樣品量較多時(shí)：進(jìn)樣體積由定量管的體積決定，為保證樣品*把定量管的流動(dòng)相置換干凈，需注射5-6倍的環(huán)體積。

　　要使用的液相注射器進(jìn)樣，不可用氣相注射器。注射器前應(yīng)用的樣品過(guò)濾器。

　　十三、液相色譜系統(tǒng)的日常維護(hù)及注意事項(xiàng)（之九）

　　高壓恒流泵的維護(hù)注意事項(xiàng)

　　泵的密封圈是易磨損的部件，密封圈的損壞可引起系統(tǒng)的許多故障，要注意保養(yǎng)和定期更換。應(yīng)采取下列措施以延長(zhǎng)使用壽命：

　　不允許在沒有流動(dòng)相或流動(dòng)相還沒有進(jìn)入泵頭的情況下啟動(dòng)泵而造成柱塞桿的干磨。

　　每天使用后應(yīng)將整個(gè)系統(tǒng)管路中的緩沖液體沖洗干凈，防止鹽沉積，整個(gè)管路要浸在無(wú)緩沖液的溶液或有機(jī)溶劑中。長(zhǎng)期不用也要定期開泵沖洗整個(gè)管路。

　　要用HPLC級(jí)試劑。

　　輸液管前端要用燒結(jié)不銹鋼沉子過(guò)濾流動(dòng)相。要注意防止管路阻塞造成壓力過(guò)高而損壞儀器。

　　壓力下限應(yīng)設(shè)置在0.5～1MPa，以防止儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被抽干或嚴(yán)重滲漏而引起柱塞桿的干磨。

　　有柱后清洗功能的高壓恒流泵還要注意保持清洗液，否則將失去柱后清洗效果。

　　十四、液相色譜系統(tǒng)的日常維護(hù)及注意事項(xiàng)（之十）

　　泵的壓力不穩(wěn)定

　　在安裝調(diào)試時(shí)以及在日常使用過(guò)程中，若出現(xiàn)壓力不穩(wěn)的現(xiàn)象。原因有幾點(diǎn)：

　　一．        管路里有氣泡，建議由流動(dòng)相多走些時(shí)間。或打開排空閥，用配件里的針筒多抽幾下。

　　二．        輸入單向閥失效所致，這也是經(jīng)常遇見的。首先如何判斷輸入單向閥失效。判斷步驟為：

　　如果是雙泵梯度分析系統(tǒng)，故泵壓力不穩(wěn)必然是其中一臺(tái)泵壓力不穩(wěn)所致，須逐個(gè)分析。

　　1 在不開UV檢測(cè)器，工作站的前提下，將其中一臺(tái)泵接上蒸餾水作為流動(dòng)相。

　　2 打開排空閥，用針筒抽出些流動(dòng)相，確認(rèn)泵中已有該流動(dòng)相，然后將針筒內(nèi)的液體排出，并重新接在排空閥上。

　　3 按“設(shè)置”鍵直至出現(xiàn)“沖洗”字樣，選擇是，并啟動(dòng)沖洗功能。流量5ml/min，時(shí)間5min（注意：此時(shí)排空閥仍要打開，否則將沖壞色譜柱）

　　4 沖洗完畢后，查看針筒內(nèi)流動(dòng)相體積是否為25ml（5×5=25），若正確，則說(shuō)明該泵在低壓情況下*；若不正確，則說(shuō)明該泵中某一單向閥失效（一般為輸入單向閥）。

　　5 用同樣方法測(cè)試另外一泵。等度只要測(cè)試一臺(tái)就可以了。

　　造成單向閥失效原因有幾點(diǎn)：

　　1 液相色譜從成品到客戶手中有一段時(shí)間，出廠前每臺(tái)儀器都要經(jīng)過(guò)調(diào)試，一段時(shí)間內(nèi)不用會(huì)造成內(nèi)部殘留流動(dòng)相與寶石球粘連的情況。客戶長(zhǎng)期不用也會(huì)造成類似情況，建議客戶在長(zhǎng)期不使用情況下，每周用甲醇作為流動(dòng)相，開機(jī)1小時(shí)使管路充滿液體。

　　2流動(dòng)相內(nèi)雜質(zhì)或其它原因污染了單向閥。雖然有的客戶認(rèn)為流動(dòng)相已過(guò)濾過(guò)了，但長(zhǎng)期使用后，由于液相色譜是微量分析儀器，難免會(huì)產(chǎn)生類似情況。這是液相色譜的普遍現(xiàn)象，國(guó)內(nèi)外的泵只要是被動(dòng)單向閥，都會(huì)有類似現(xiàn)象發(fā)生，這并不是儀器的質(zhì)量問(wèn)題，而是日常維護(hù)的一部分。現(xiàn)在介紹一個(gè)簡(jiǎn)單而有效的單向閥失效的處理辦法。

　　單向閥失效處理方法：

　　1 擰下輸入單向閥（一共兩個(gè)）

　　2 將2個(gè)單向閥放入超聲波清洗器，用蒸餾水清洗10分鐘。

　　2 用本公司提供的針頭沖一下（將針頭擰緊在單向閥輸入端即可，見配件清單）。沖的時(shí)候注意要用手按住單向閥前頭的墊圈，防止沖時(shí)墊圈被沖落。

　　3 完畢后，將輸入單向閥裝回原位即可。（注意單向閥須擰緊）

　　若兩個(gè)泵在低壓狀態(tài)下流量都正確，則建議分別將兩泵連接上色譜柱進(jìn)行高壓測(cè)試。

　　高壓測(cè)試具體操作方法：

　　1 在雙泵分析系統(tǒng)連接的前提下，只須先打開其中一泵（確認(rèn)接好流動(dòng)相）

　　2 設(shè)置流量1ml/min

　　3 啟動(dòng)泵

　　4 觀察運(yùn)行期間，泵的壓力是否穩(wěn)定。若穩(wěn)定，說(shuō)明泵無(wú)問(wèn)題；若泵壓力不穩(wěn)，則應(yīng)檢查各管路接頭有無(wú)泄露，并將有泄漏的接頭擰緊；若無(wú)泄漏，則問(wèn)題可能還是出在單向閥上，須再次沖單向閥，反復(fù)試驗(yàn)。

　　（注：不必打開UV檢測(cè)器及工作站）

　　5 重復(fù)上述步驟，對(duì)另一臺(tái)泵進(jìn)行高壓測(cè)試

　　三. 如還出現(xiàn)壓力不穩(wěn)的情況，有可能密封圈受損，建議更換。

　　十五、液相色譜系統(tǒng)的日常維護(hù)及注意事項(xiàng)（之十一）

　　紫外檢測(cè)器的維護(hù)注意事項(xiàng)

　　要保持檢測(cè)器中的流通池清潔，每天用后注意沖洗整個(gè)管路。要定期用強(qiáng)溶劑反向沖洗流通池（斷開柱），以清洗流通池。

　　流動(dòng)相要脫氣，防止氣泡滯留在流通池內(nèi)，影響分析效果。

　　注意氘燈的保養(yǎng)，及時(shí)更換。

　　十六、關(guān)于國(guó)產(chǎn)液相與進(jìn)口液相差距的分析

　　目前分析儀器行業(yè)普遍存在此現(xiàn)象：輕視國(guó)產(chǎn)儀器，輕信國(guó)外儀器。本人作為一個(gè)長(zhǎng)期從事于色譜儀器，以及液相色譜的研發(fā)者和制造者的角度，對(duì)于國(guó)產(chǎn)和國(guó)外儀器進(jìn)行個(gè)簡(jiǎn)單得比較分析，望能以偏見全，以小見大給國(guó)人對(duì)國(guó)產(chǎn)科學(xué)儀器有個(gè)更準(zhǔn)確地認(rèn)識(shí)。對(duì)于我們從業(yè)者來(lái)說(shuō)也是“知己知彼，方能百戰(zhàn)不殆”。并且希望能在分析中提升用戶、產(chǎn)界、業(yè)界和決策者的信心。

　　就國(guó)內(nèi)液相色譜儀的市場(chǎng)80%是被國(guó)外產(chǎn)品占領(lǐng)，且科技力量重理論和應(yīng)用而疏于對(duì)儀器的研究和發(fā)展。另外，理論和應(yīng)用的發(fā)展速度往往要快于儀器的研發(fā)速度。我國(guó)起步又晚，造成許多應(yīng)用者偏愛國(guó)外儀器，這也是目前很多理論和應(yīng)用的論文都是基于國(guó)外儀器上的原因之一。這樣更加加劇了用戶對(duì)國(guó)產(chǎn)儀器的偏見。作為一個(gè)儀器的研發(fā)者和制造者,我們承認(rèn)與*進(jìn)口儀器有著差距，但我們也不能妄自菲薄。國(guó)外儀器有“好、中、次”，國(guó)產(chǎn)儀器也是一樣。不能一概而論，國(guó)外的都是好的，國(guó)產(chǎn)的都是不行的。所以在此本人用首先做個(gè)技術(shù)指標(biāo)的分析，采用目前幾個(gè)流行機(jī)種所公布的指標(biāo)進(jìn)行比較。

　　流量范圍 流量精度 流量準(zhǔn)確度 高壓力

　　LC-1000.001-9.999ml/min，以0.001ml/min步長(zhǎng)調(diào)節(jié)流量 Sr<0.3%

　　(0.5,1,2ml/min 水，5-10MPa室溫） Ss<±2%

　　(1ml/min 水，5-10MPa室溫） 42MPa(0.001-9.999ml/min)

　　美國(guó)某公司515 0.001-9.999ml/min RSD<0.1%(1ml/min) 6000psi

　　日本某公司LC-10ADVP 0.001-5ml/min（1-39.2MPa）5.001-9.999ml/min（1-19.6MPa） ±0.3%以內(nèi)(RSD<0.1%)

　　0.1-5ml/min,1.0-39.2MPa,水,步距 ±2% ( 0.01-5ml/min，1.0-39.2MPa，水，室溫20℃) 39.2MPa

　　大連某公司P230 0,001-9.999ml/min，以0.001ml/min步長(zhǎng)調(diào)節(jié)流量 RSD<0.3%(0.001-4.999ml/min)

　　RSD<0.5%(5.000-9.999ml/min) ±2%(1ml/min，5-10MPa，水，室溫)

　　±3.0%或3μl/min（其他條件） 40MPa(0.001-4.999ml/min)

　　20MPa(5.000-9.999ml/min)

　　表1泵基本技術(shù)指標(biāo)比較

　　從泵的技術(shù)指標(biāo)來(lái)看，首先國(guó)產(chǎn)儀器的耐壓并不比國(guó)外儀器來(lái)得低。從市場(chǎng)上推出的幾款國(guó)產(chǎn)儀器所公布的技術(shù)指標(biāo)也基本在40-42MPa,所以國(guó)產(chǎn)泵輸液耐壓低的情況不存在。另外幾個(gè)指標(biāo)也不相上下，特別是日本某公司的產(chǎn)品在某些指標(biāo)上還比不上國(guó)產(chǎn)的儀器。但國(guó)內(nèi)很多人有這樣觀點(diǎn)認(rèn)為：國(guó)產(chǎn)泵的材料性能差，耐磨性和密封性差。我個(gè)人認(rèn)為以前確實(shí)存在此現(xiàn)象，但不代表現(xiàn)在還是此狀況。自我國(guó)進(jìn)入了WTO,關(guān)鍵材料的貿(mào)易壁壘基本上已不存在。就一臺(tái)高壓恒流泵來(lái)說(shuō)，主要的材料是316L不銹鋼，聚四氟乙烯和寶石等。目前這些國(guó)產(chǎn)材料性能均已過(guò)關(guān)，實(shí)在不行進(jìn)口也相當(dāng)方便，如：高級(jí)工程塑料Peek和目前難于解決的高壓密封圈等均可以從世界上專業(yè)的生產(chǎn)商和經(jīng)銷商處購(gòu)得。所以可以這樣說(shuō)，國(guó)外泵上用什么材料，我們也可以。再說(shuō)其它指標(biāo)，以我公司推出的伍豐LC-100液相色譜儀的高壓恒流泵來(lái)舉例。流量范圍可從0.001mL/min至10mL/min,在此全范圍內(nèi)高工作壓力可達(dá)42MPa.。另外，在1mL/min流量、壓力在5-10MPa范圍內(nèi)，壓力脈沖在0.1MPa，系統(tǒng)的定性標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD6 可在0.1%以下。該泵的主要零部件均的數(shù)控加工中心制造，它的各項(xiàng)指標(biāo)和可靠性均達(dá)到同類國(guó)外儀器的水平。所以說(shuō)國(guó)產(chǎn)儀器從材質(zhì)，加工方法均可與國(guó)外儀器看齊，做到不相上下。至于國(guó)產(chǎn)泵到現(xiàn)在為什么還或多或少存在一些問(wèn)題，我們稍后分析。

　　表2 紫外檢測(cè)器比較

　　波長(zhǎng)范圍 波長(zhǎng)示值誤差 波長(zhǎng)重復(fù)性 基線噪音 基線漂移 小檢測(cè)量

　　LC-100 190-600nm ≤±2nm ≤0.2nm ≤5×10-5AU

　　(甲醇, 1ml/min,254nm, 20℃) ≤5×10-4AU/h (甲醇, 1ml/min,254nm, 20℃) 2×10-8g/ml(萘/甲醇溶液)

　　美國(guó)某公司486 190-600nm ±2nm ±0.25nm ±1.0×10-5AU, (1秒濾波時(shí)間, 210nm-280nm, 空池) 1.0×10-4AU/h (預(yù)熱后)

　　日本某公司LC-10ADVP 190-600nm ±1nm ±0.1nm ±0.35×10-5AU以下(254nm,空池) 2×10-4AU/h以下 (室溫一定)

　　大連某公司P230 190nm-400nm（氘燈）

　　190nm-720nm（氘燈+鎢燈） 2.1nm 0.2nm ≤±5.0×10-5AU (空池、254nm、 1.0s) ≤±5.0×10-4AU/h (空池、254nm、 穩(wěn)定時(shí)間60min)

　　表2列出了幾項(xiàng)檢測(cè)器的指標(biāo)對(duì)比。日本某公司儀器公布的一個(gè)主要的技術(shù)指標(biāo)，基線噪音看上去是：小于±0.35×10-5AU，但是我們不能忽略其測(cè)試條件為：空池、波長(zhǎng)254nm,濾波時(shí)間常數(shù)1秒。另外有一點(diǎn)須注意：在0.35之前有正負(fù)號(hào)。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：JJG705-2002衡量噪音指標(biāo)是峰-峰值，±0.35×10-5AU既為峰-峰值0.7×10-5AU。此指標(biāo)只考核了UV檢測(cè)器光學(xué)和電氣的特性，與實(shí)際情況相差甚遠(yuǎn)，并沒有考驗(yàn)泵的壓力脈動(dòng)，液流回路的阻尼和UV檢測(cè)器流通池的性能。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)UV檢測(cè)器的噪音指標(biāo)是在甲醇，1mL/min 流量下，聯(lián)接上了色譜柱后測(cè)試UV檢測(cè)器基線噪音的峰-峰值，這才真實(shí)反映了液相色譜儀的噪音水平。

　　下面我再以伍豐LC-100液相色譜儀的紫外檢測(cè)器舉例。列出空池噪音，漂移和波長(zhǎng)精度指標(biāo)的圖譜。這里我要強(qiáng)調(diào)這些圖譜是LC-UV100紫外檢測(cè)器將數(shù)字信號(hào)直接輸出至PC機(jī)而顯示的結(jié)果，沒有任何記錄誤差。

　　請(qǐng)看以下各圖：

　　空池噪音：≤±0.25×10-5AU（254nm,20℃）

　　這是按照日本某公司的條件所測(cè)出的儀器噪音，伍豐LC-100優(yōu)于該公司所公布的指標(biāo)。

　　空池漂移：≤0.4×10-4AU/h

　　波長(zhǎng)示值誤差：≤±1nm

　　按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)UV檢測(cè)器的噪音和漂移指標(biāo)是在甲醇，1mL/min 流量下，聯(lián)接上了色譜柱后測(cè)試。該儀器也*能和國(guó)外儀器有一比（如下圖）。另外噪音和漂移指標(biāo)的比較還要在另外指標(biāo):小檢測(cè)濃度相同的基礎(chǔ)上。小檢測(cè)濃度是考驗(yàn)儀器的靈敏度。小檢測(cè)濃度數(shù)值大，儀器的靈敏度就小，不能反應(yīng)真正的噪音和漂移水平。

　　噪音：≤2×10-5AU (甲醇，1mL/min 254nm,20℃)

　　漂移：≤2×10-4AU/h (甲醇，1mL/min 254nm,20℃)

　　從以上技術(shù)指標(biāo)對(duì)比分析看出，我們國(guó)產(chǎn)儀器*不比國(guó)外的差，甚至可以超過(guò)某些國(guó)外儀器。我們希望業(yè)內(nèi)人士正確認(rèn)識(shí)和報(bào)道國(guó)產(chǎn)儀器。過(guò)分的夸大國(guó)外產(chǎn)品*和國(guó)內(nèi)儀器的落后，只會(huì)導(dǎo)致用戶紛紛盲目地購(gòu)置國(guó)外產(chǎn)品，使大量國(guó)外低檔儀器涌入國(guó)內(nèi)市場(chǎng),抑制了國(guó)產(chǎn)儀器的發(fā)展。如某國(guó)外公司蘇州廠所生產(chǎn)的液相色譜儀，是其90年代初期開發(fā)的產(chǎn)品。無(wú)論從其功能、指標(biāo)均無(wú)*性可談，但大量充數(shù)國(guó)內(nèi)市場(chǎng)。當(dāng)然，作為一個(gè)研發(fā)者和制造者我們應(yīng)看到和國(guó)外公司的差距。只有正確地認(rèn)識(shí)到差距，我們才能愈快的縮小它。但我認(rèn)為這個(gè)差距不能簡(jiǎn)單的以技術(shù)差距來(lái)詮釋，這技術(shù)差距應(yīng)延伸至：管理技術(shù)和市場(chǎng)學(xué)運(yùn)用技術(shù)等方面。對(duì)于未來(lái)的發(fā)展，本人提出幾點(diǎn)建議，望能拋磚引玉。